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38.血培养标本采集与运送SOP(版)
一、采集指征
可疑感染患者出现以下任一指征时，可考虑采集血培养：
1.体温（T38℃）或（T36℃）；
2.寒战；
3.外周血白细胞计数增多（计数10.0×/L,特别有“核左移”时）或减少（计数4.0×/L)；
4.呼吸频率20次/min或动脉血二氧化碳分压32mmHg;
5.心率90次/min;
6.皮肤黏膜出血；
7.昏迷；
8.多器官功能障碍；
9.血压降低；
10.炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原、G试验升高等。
二、采血时间
寒战或发热初起时采集,抗菌药物应用之前采集最佳。
三、采集套数
成人每次应采集2-3套，每套从不同穿刺点进行采集，2d-5d内无需重复采集。如怀疑感染性心内膜炎，应重复采集多套。儿童通常仅采集需氧瓶。
四、采血量
1.成人：每个血培养瓶8—10ml，或按照说明书采集。
2.婴幼儿及儿童采血量不应超过患者总血量的1％，具体采血量参照说明书。
五、采集方法及流程
1.采集静脉血；仅在评估导管相关性血流感染时采集导管血。血培养宜单独采集，与其他检测项目同时采血，应先接种血培养瓶，以防污染。
2.采集前做好手卫生，静脉穿刺点选定后去除血培养瓶的塑料瓶帽，使用75％乙醇消*，自然干燥60s,注意采血前检查血培养瓶是否完好无损、是否过期。
3.皮肤穿刺点消*--三步法
a)75％乙醇擦拭静脉穿刺部位，待干30s以上；
b)1％碘伏作用60s，从穿刺点向外画圈消*，至消*区域直径达3cm以上。
c)75％乙醇擦拭碘酊或碘伏消*过的区域进行脱碘；
对碘过敏患者，在第一步基础上再用75％乙醇消*60s,待酒精挥发干燥后采血。
4.培养瓶接种
（1）在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可带乳胶手套固定静脉，但不可接触穿刺点。
（2）血培养接种到培养瓶后轻轻颠倒混匀以防血液凝固。
（3）如采血针采血：先将8-10ml血标本接种到需氧瓶，再将剩下的血标本接种到厌氧瓶，并轻轻摇；如注射器采血：一个部位采集血标本约20ml；先将8-10ml血标本接种到厌氧瓶，再将剩下的血标本接种到需氧瓶，并轻轻摇。
六、标本运送要求
1.检验单需注明抗菌药物使用情况、临床诊断等患者信息。送检标本正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。
2.血培养标本采集后应立即送检最好2h内，如果不能及时送检宜置于室温环境，勿放冰箱。
七、血培养报告流程
（一）紧急口头（电话）报告
1.血培养出现阳性报警时，立即进行革兰氏染色、镜检。
2.在最短时间内向临床医师口头报告镜检结果。
（二）最终书面报告
1.无菌生长（培养5天无需氧菌和厌氧菌生长）
2.阳性培养结果（最终鉴定结果、药敏结果）
参考标准
《临床微生物实验室血培养操作规范（WS/T-）》。
39.痰培养标本采集与运送SOP(版)
一、采集指征
出现咳嗽、咳痰、呼吸困难、肺部罗音或胸部影像学提示下呼吸道感染时。
二、采集原则
1.采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。
2.宜采集清晨第二口痰。
3.怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集三天清晨痰液送检。
三、采集方法
（一）自然咳痰法
1.用物准备：无菌容器盒、生理盐水。
2.自然咳痰法：咳痰前，患者用无菌生理盐水漱口，指导患者咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。标本量应≥1ml。
（二）气管吸出物
仅当气管插管的患者出现肺炎症状时（如发热或浸润），可采集气管吸出物标本。从气管中吸痰，用无菌容器留取送检。
注：气管在插管24h后即有定植菌，若未有肺部感染指征时送检气管吸出物，可导致结果与疾病不符。
四、标本运送和保存
用无菌防漏容器收集标本，应在2h内送至微生物实验室，否则应2℃-8℃环境但时间不超过24h，但培养分离到肺炎链球菌等苛养菌的机会和数量会减少。
五、筛选并拒收的标本
1.24h内重复采集的痰细菌培养标本；
2.唾液；
3.鼻冲洗液和分泌物、鼻孔拭子；
4.咽部标本；
5.未经保护套收集的支气管刷培养标本；
6.痰的厌氧菌培养标本；
7.诱导痰。
参考标准
《下呼吸道感染细菌培养操作指南（WS/T-）》。
40.尿培养标本采集与运送SOP(版)
一、采集指征
（一）症状体征
患者出现以下症状和体征之一，怀疑有尿路感染时，应进行尿培养：
1.有典型的尿路感染症状。
2.肉眼血尿或脓尿。
3.尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性。
4.不明原因发热，无其它局部症状。
5.留置导尿管的患者出现发热。
6.膀胱排空功能受损。
7.尿道口有脓性分泌物。
8.泌尿系统疾病手术前。
（二）疾病指征
1.尿路感染。2.肾结核。3.泌尿系结石、前列腺增生。4.无症状性菌尿。
二、采集时机与频次
（一）采集时机
1.抗菌药物使用前。
2.宜采集晨尿，嘱患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱内潴留至少４ｈ以上，可降低假阴性率。
（二）采集频次
1.具有尿频尿急尿痛等明显症状的患者，治疗48-72小时后可采集第二份标本。
2.对于症状不明显的患者，需采集2-3份标本。
3.怀疑肾结核时，应连续三天采集晨尿。
三、标本采集流程
（一）采集容器
容积＞50ml广口、宽底、无菌容器
（二）采集方法
1.清洁中段尿采集：
（1）女性采样前用肥皂水或碘伏溶液冲洗外阴部,用手指分开阴唇，弃前段尿，不终止排尿，留取中段尿约10-20ml于专用的无菌容器中。
（2）男性采样前用肥皂水或碘伏溶液清洗尿道口,擦干后上翻包皮，弃前段尿，不终止排尿，留取中段尿约10-20ml于专用的无菌容器中。
2.导尿管尿采集
（1）直接导尿法：使用碘伏溶液消*会阴局部，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃其前段尿约15-30ml，再留取中段尿约10-20ml于专用的无菌容器中。
（2）留置导尿管法：采集前先夹闭导尿管，夹闭时间不超过0.5h，采集时则松管弃其前段尿液，使用碘伏等消*液消*导尿管的采样部位，使用无菌注射器从采样口或靠近尿道导尿管管壁抽取尿液10-20ml于专用的无菌容器中；不能从集尿袋中采集尿液。
四、标本运送与保存
1.标本采集后应及时送检并接种，室温下保存时间不应超过2小时（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存）如不能及时运送或接种4℃冷藏保存时间不得超过24h。
2.冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。
五、注意事项
1.不应从集尿袋采集尿液。
2.尿液不应加防腐剂或消*剂。
3.如果尿液培养前患者曾使用药物，应反复多次送检。
4.多次收集或24小时尿不应用于尿液培养。
5.培养结果应结合临床表现、菌落计数以及微生物种类等进行综合判断。
参考标准
《尿路感染临床微生物实验室诊断WST-》。
41.手术部位感染标本采集和运送SOP
一、采集指征
（一）症状体征
1.局部症状：红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。
2.全身症状：感染较重者常有发热、头痛、全身不适、乏力、食欲减退等，一般均有白细胞计数增加和核左移，全身性感染严重的患者可发生感染性休克。
（二）疾病指征
1.软组织的急性化脓性炎症如疖、痈、急性蜂窝织炎和丹*等。
2.化脓性疾病：如甲沟炎、化脓性关节炎、细菌性结膜炎、化脓性扁桃体炎和急性化脓性中耳炎等。
3.脓肿：扁桃体脓肿、咽部脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、肾周脓肿等。
4.创伤感染：术后切口感染、导管感染、脐带残端感染等。
二、采集时机
1.尽量在抗菌药物使用前或停药一周后采集标本。
2.如不能停用抗菌药物应于下次抗菌药物使用前采集。
三、采集容器
1.较大的标本：置于无菌容器内。
2.较小的标本或拭子标本：置于运送培养基内。
四、采集方法
（一）开放性伤口：
1.无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。
2.用拭子深入伤口的基底部或伤口与正常组织边缘部采集两个标本分别用于革兰染色和培养。
（二）封闭性脓肿：
1.皮肤消*流程：
1）如果选定的静脉穿刺位置明显较脏，应先清洁该区域。
2）第一步：75%乙醇消*覆盖整个待消*区域，确保消*液接触皮肤时间至少30秒，再等30秒后晾干。
3）第二步：碘酊消*覆盖整个区域，确保消*液在皮肤上停留至少30秒，待消*区域彻底晾干约30秒；如使用碘伏涂擦两遍需要1.5—2分钟。
4）第三步：碘酊消*后75%乙醇脱碘。
5）完成皮肤消*后不要触碰该区域，如果患者对碘制剂过敏可选择75%乙醇或葡萄糖酸氯已定消*2遍。
2.注射器穿刺抽取脓液。
3.若无法抽到脓液应先皮下注射少量生理盐水，再次穿刺抽取脓液；若脓液过多应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。采集量应＞1ml为宜。
4.排出注射器内部及针头的气体用无菌橡皮塞封闭针头送检，或直接打入血培养瓶中；若疑为厌氧菌时，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。
（三）组织和活检标本：
1.采集足够大的组织体积以1mm3为宜，避免在坏死区域采集。
2.将小块的组织放在运送培养基内，较大的放在无菌容器中并加入少量无菌生理盐水。
五、注意事项
1.开放伤口使用无菌生理盐水充分冲洗，不可使用消*剂。
2.标本采集后填写患者信息、标本类型（深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等）、标本来源（腹腔、四肢等），记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗菌药物前采集，选择检查项目（需氧培养或厌氧培养）。
六、标本运送与保存
1.标本应在采集后30min中内送到实验室，送检时应保持标本湿润。
2.在送检前或运送过程中禁止将标本放于冰箱，若不能及时送检应室温保存，但最长不超过24小时。
参考文献：
胡必杰主编版《医院感染预防与控制标准操作规程》、郭燕红主审版《SIFIC医院感染预防与控制临床实践指南》。
42.粪便标本采集与运送SOP
一、采集指征
当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养。
1.粪便涂片镜检白细胞≥5个／HP。
2.重症腹泻，体温＞38.5℃。
3.血便或便中有脓液。
4.未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者。
5.来自疫区的患者。
6.抗生素治疗后腹泻：常发生与长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。
7.高热惊厥：通常为中*性痢疾。
二、采集时机
1.标本采集尽可能在发病早期和应用抗菌药物治疗之前。
2.在急性期留取腹泻粪便标本。
3.在不同的时间内采集2-3份标本可以提高致病菌的分离率。
三、采集容器
要求使用清洁带防护盖的防渗广口容器，送检的标本中不能加入防腐剂。
四、采集方法
1.自然排便法
本法为常规方法。自然排便后，挑取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便2-3g，液体粪便则取絮状物，一般取1-3ml；直接留置粪便标本于清洁、干燥广口容器中送检。若无脓血、粘液时，则在粪便上多点采集送检。
2.直肠拭子法
本法只适用于排便困难患者或婴幼儿，不推荐使用拭子做常规性病原菌培养。用肥皂水将肛门周围洗净，用蘸有无菌生理盐水棉拭子插入肛门，成人4-5cm，儿童2-3cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转拭子，可在拭子上明显见到粪便，插入运送培养基内，立即送检。
五、标本运送与保存
1.标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存≤2h。
2.直肠拭子采集的标本必须转入运送培养基中送检。
3.高度怀疑霍乱弧菌感染时的运送，标本运送必须符合特殊标本的安全规定。
4.当怀疑沙门菌、志贺菌、弯曲菌以外的细菌引起的腹泻时，临床医师必须通知实验室，因为分离弧菌、耶尔森菌属、气单胞菌、大肠埃希氏菌需要特殊的实验程序和培养基。
5.粪便标本一般不做厌氧培养。
参考文献：
郭燕红主审版《SIFIC医院感染预防与控制临床实践指南》。
43.脑脊液标本采集与运送SOP
一、采集指征
有脑膜炎症状，临床怀疑有脑膜炎感染，应进行细菌培养。
二、采集时机
1.尽量在抗菌药物使用前或停药一周后采集标本。
2.如不能停用抗菌药物应于下次抗菌药物使用前采集。
三、物品准备
无菌试管、无菌穿刺包。
四、采集方法
病人应先禁食，医师应严格按照无菌操作进行腰椎穿刺；成年患者第3和第4腰椎间隙或稍低处穿刺，小儿则于第4和第5腰椎间隙穿刺，取得脑脊液后装入无菌试管立即送检。
五、标本运送与保存
1.标本采集后应置于无菌试管内尽快送检，决不可冷藏！！！每种检验需要最小量，细菌培养≥1ml，真菌≥2ml，抗酸杆菌≥2ml。
2.如果脑脊液采集多管时，第一管送微生物实验室进行培养。
3、冬天应注意保温，否则影响检出率。
参考文献：
郭燕红主审版《SIFIC医院感染预防与控制临床实践指南》。
44.无菌体液标本采集与运送SOP
无菌体液是指除血液、骨髓、脑脊液以外的胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜积液和胆汁等穿刺液。
一、采集指征
（一）胸腔积液
1.症状指征：伴有胸痛、发热、胸腔积液。
2.疾病指征：结核性胸膜炎、细菌性肺炎引起的胸膜炎，真菌感染引起的胸腔积液。
（二）腹水
1.症状指征:腹部有积液伴腹痛、呕吐、肌紧张、肠鸣音减弱或消失。
2.疾病指征:原发性或继发性腹膜炎。
（三）心包液
1.症状指征：发冷、发热、心悸、出汗、乏力及精神症状，心前区疼痛，心包摩擦音，心音明显减弱，有肺实变体征可出现心脏压塞征象。
2.疾病指征：结核性、风湿性、急性非特异性心包炎。
（四）关节液
1.症状指征：关节肿胀，关节周围肌肉发生保护性痉挛，严重时出现全身寒战与高热，局部温度增高。
2.疾病指征:化脓性关节炎。
（五）鞘膜积液
1.症状指征：一侧睾丸急性发作疼痛，并向腹股沟部放射，自觉局部肿胀发热。
2.疾病指征：急性睾丸炎等。
（六）胆汁
1.症状指征：腹痛、*疸、右上腹压痛、肌紧张、中*或休克，常伴有恶心、呕吐、发热、尿少且*。
2.疾病指征：胆石病、胆囊炎、肝胆系统感染等。
二、采集时机
1.尽量在抗菌药物使用前或停药一周后采集标本。
2.如不能停用抗菌药物应于下次抗菌药物使用前采集。
三、采集容器
无菌试管或无菌容器
四、采集方法
由临床医师按相应规程无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本采集量5ml左右，为防止无菌体液凝固应在无菌容器内先加入灭菌肝素0.5ml（可抗凝5ml标本），再注入各种穿刺液，轻轻混合后立即送检。
五、标本运送与保存
标本采集后立即送检
参考文献：
郭燕红主审版《SIFIC医院感染预防与控制临床实践指南》
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